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耐药株构建
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产品概述
实验流程:
1.准备细胞、药物后,检测药物IC50(72h),待IC50(SPSS软件统计)结果
出来后,与客户汇报进展,推进项目(预计时间2-3周);
2.采用药物共培养的方式构建耐药株,具体为:调整细胞密度60%左右,药物浓
度为IC5、IC10、IC20、IC30,含药培养48-72h后撤药(采用6孔板实验,具体
时间已显微镜观察为准(细胞死亡不超过20%),拍照记录),换入正常培养基,
观察细胞状态,
3.在加药共培养的过程中,观察细胞每次加药培养后的状态和恢复速度,如果细
胞在撤药后,恢复时间较长(超过7天),状态较差,则说明该细胞不适合构建耐
药株,成功概率较低,建议终止实验;(预计总时间2月内)
4.待细胞生长恢复后,冻存一支,重复步骤2(依据细胞情况,可适当提高药物
浓度),进行5~8轮培养后,即可构建出有一定耐药性的细胞
5.细胞构建完成后,给客户提供一株亲本株和一株耐药株,提交的结果是亲本株
和耐药株的IC50结果,耐药倍数(大于5倍)和实验报告;(预计总时间8-10月)
STR鉴定
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